AML12，全稱(chēng)Alpha Mouse Liver 12，是科研領(lǐng)域常用的小鼠永生化肝細(xì)胞系，取自攜帶人TGF-α基因的3月齡CD1品系轉(zhuǎn)基因小鼠正常肝組織，是體外模擬肝細(xì)胞生理狀態(tài)的經(jīng)典細(xì)胞模型。該細(xì)胞為上皮樣形態(tài)，貼壁生長(zhǎng)，不具備致瘤能力，不會(huì)在軟瓊脂中形成克隆，也無(wú)法在免疫缺陷小鼠體內(nèi)成瘤，在實(shí)驗(yàn)安全層面具備相應(yīng)優(yōu)勢(shì)。

　　借助電鏡觀察可以看到，AML12保留肝細(xì)胞典型亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，包含過(guò)氧化物酶體與膽管樣結(jié)構(gòu)，能夠維持多種肝臟特異性基因表達(dá)，可合成白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、α-1抗胰蛋白酶等血清相關(guān)蛋白，同時(shí)表達(dá)連接蛋白26、32等縫隙連接蛋白，僅含有乳酸脫氫酶同工酶5，這些特征證明它保留了分化肝細(xì)胞的部分功能屬性。不過(guò)該細(xì)胞存在特性波動(dòng)現(xiàn)象，長(zhǎng)期常規(guī)培養(yǎng)時(shí)，肝臟特異性蛋白表達(dá)水平會(huì)逐步下降，更換至無(wú)血清培養(yǎng)體系后，相關(guān)表達(dá)可重新回升，這也是培養(yǎng)操作中需要留意的要點(diǎn)。

　　AML12的培養(yǎng)有特定營(yíng)養(yǎng)需求，基礎(chǔ)培養(yǎng)基多選用DMEM/F12，還需要搭配胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒復(fù)合添加劑與地塞米松，維持細(xì)胞增殖與肝相關(guān)功能。培養(yǎng)環(huán)境為37℃、5%二氧化碳，常規(guī)傳代比例可控制在1:3至1:6，每2至3天更換一次培養(yǎng)液，傳代操作需把控細(xì)胞密度，密度過(guò)高會(huì)加速細(xì)胞功能丟失，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)穩(wěn)定性。

　　在科研應(yīng)用上，AML12適用范圍較廣。藥物毒理學(xué)是其主要應(yīng)用方向，科研人員利用該細(xì)胞評(píng)估外源物質(zhì)對(duì)肝細(xì)胞的損傷，分析藥物代謝、氧化應(yīng)激、脂質(zhì)沉積等過(guò)程，開(kāi)展高通量藥物篩選工作。在肝病基礎(chǔ)研究中，它常被用于構(gòu)建脂肪肝、肝損傷、肝纖維化相關(guān)體外模型，探究各類(lèi)因子調(diào)控肝細(xì)胞存活、脂代謝、炎癥反應(yīng)的分子機(jī)制。同時(shí)，AML12也可作為基因轉(zhuǎn)染宿主，用于基因過(guò)表達(dá)或沉默實(shí)驗(yàn)，解析靶基因在肝細(xì)胞內(nèi)的生物學(xué)功能，還可用于三維細(xì)胞培養(yǎng)體系搭建，模擬肝臟微環(huán)境開(kāi)展相關(guān)研究。

　　作為體外細(xì)胞模型，AML12存在一定局限性。它屬于永生化細(xì)胞，基因組與原代肝細(xì)胞存在差異，細(xì)胞功能不能完全復(fù)刻活體肝臟復(fù)雜微環(huán)境，部分肝臟代謝通路活性與體內(nèi)真實(shí)肝細(xì)胞有區(qū)別。因此實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)階段，研究者需要結(jié)合研究目的，搭配原代肝細(xì)胞或者動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，對(duì)結(jié)論相互驗(yàn)證。

　　綜合來(lái)看，AML12憑借易培養(yǎng)、可穩(wěn)定傳代、保留部分肝細(xì)胞功能的特點(diǎn)，降低了肝臟體外研究的門(mén)檻，為肝毒性評(píng)估、代謝機(jī)制、肝病病理機(jī)制探索提供了便捷的體外工具，至今仍是肝臟基礎(chǔ)科研中使用頻次較高的細(xì)胞模型之一。